高甜度monellin的中试生产

研究课题负责人: 郭三堆 

项目负责人: 郭三堆

项目名称: 高甜度monellin的中试生产

项目类别: IA3

项目综合简介: 随着人们生活质量和健康水平的提高与改善,对热量低又安全的食品添加剂及甜味剂的需求越来越迫切。 Monellin是一种新型蛋白质甜味剂,甜度是蔗糖的3000-4000倍,热量低,又不易被细菌所利用,适于糖尿病、心血管病等患者食用,且能预防儿童龋齿,因而它是一类很有商业化发展前途的甜味添加剂。目前市场价格极其昂贵,约为7.2美元/毫克。本实验室已经根据monellin的氨基酸序列,设计合成了monellin基因,构建了细菌表达载体,转入大肠杆菌,获得了可高效表达甜蛋白的基因工程菌。可通过发酵培育,从菌体中大量分离纯化monellin甜蛋白。同时,采用酵母优化密码子,合成了monellin基因并构建了酵母表达载体pPIC9M,电击转化后获得重组毕赤酵母GS115/pPIC9M。在此表达系统中,高甜度monellin的摇瓶表达量约0.25g/L,30L发酵罐分泌表达量约2g/L。

项目技术特点优势: 利用本项目生产的甜味剂monellin具有甜度高、热量低、不易被细菌所利用等特点,因而具有良好的商业化应用前景。本项目应用的重组毕赤酵母GS115/pPIC9M 30L发酵罐表达量约2g/L;并且,甜味剂monellin为分泌表达,产品纯化程序简单。

项目鉴定和获奖情况: 2001年,“利用大肠杆菌生产高甜度monellin”通过了成果鉴定,“利用酵母分泌生产monellin”尚未进行成果鉴定。

项目知识产权情况: 相关技术已申请4项中国发明专利,其中“编码甜蛋白的合成DNA序列及生产该蛋白质的方法”(专利号:ZL 95 1 17885.7)和“高甜度莫奈灵DNA序列及高效表达所述DNA序列的方法”(专利号:ZL 98 1 02420.3)已获专利证书;“适用于高密度发酵的毕赤酵母新菌株”(专利公开号:CN 1546646A)和“用毕赤酵母分泌表达高甜度莫奈灵”(专利公开号:CN 1546663A)均已进入公开实审阶段。

项目原料要求: 利用酵母分泌生产甜味剂monellin使用的培养基有两种,(1)BMGY培养基(生长培养基):1%酵母提取物,2%蛋白胨,100mmol/L磷酸缓冲液(PH6.0),1.34%YNB,0.00004%Biotin,1%甘油(V/V);(2)BMMY培养基(诱导表达培养基):除以0.5%甲醇代替甘油,其余成分与BMGY相同。

适用范围和地区: 适宜作为少年儿童预防龋齿以及糖尿病、肥胖症、高血压、心血管病等患者使用的甜味剂。

市场预测: 据调查,甜味剂monellin的市场容量约在200亿美元左右。

风险因素: / 

投资规模/转让价格: 3000万元左右